自FDA各種文件（包括化學(xué)原料藥檢查指南、生物技術(shù)檢查指南）首次提出這個(gè)問(wèn)題之后，清洗過(guò)程的驗證已經(jīng)引發(fā)了很多討論。FDA的文件明確指出要求對清洗過(guò)程進(jìn)行驗證。

本指南討論了各種可接受（或不可接受）的驗證方法，從而使FDA的檢查具有一致性。但必須清楚地認識到：與其他工藝驗證一樣，清洗驗證方法也不止一種。所有過(guò)程驗證的檢查標準是：檢查其科學(xué)數據能否證明系統穩定一致地達到預期目的，系統結果穩定地符合預先制定的標準。

本指南僅適用于設備化學(xué)殘留物的清洗驗證。

 

 

對于FDA而言，使用設備前進(jìn)行清洗不是什么新要求。1963年GMP法（133.4）規定“設備應處于清潔、有序的狀態(tài)”。1978年的cGMP中規定了設備清洗的章節（211.67）。要求清洗設備的主要目的還是防止污染或混料。由于設備清洗維護不當或防塵管理不當，FDA檢查官曾十分注意檢查衛生狀況。過(guò)去FDA總是更注意檢查青霉素類(lèi)與非青霉素類(lèi)藥物之間的交叉污染、藥品與甾類(lèi)物質(zhì)或激素之間的交叉污染問(wèn)題。在過(guò)去二十年間，因實(shí)際或潛在的青霉素交叉污染問(wèn)題已從市場(chǎng)上撤回了大量的藥品。

另一個(gè)事件使FDA對交叉污染問(wèn)題日益重視，即1988年從市場(chǎng)上撤回了消膽胺成品制劑，原因是規程不當。生產(chǎn)該制劑的原料藥受到了農業(yè)殺蟲(chóng)劑生產(chǎn)中少量中間體和降解物質(zhì)的污染。造成交叉污染的主要原因使用了回收溶媒。而回收溶媒受到了污染，原因是對溶媒桶的重復使用缺少監控。貯存殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生的回收溶媒桶又重復地用于貯存該藥品生產(chǎn)中的回收溶媒。而工廠(chǎng)沒(méi)有對這些溶媒桶進(jìn)行有效的監控，沒(méi)有對其中的溶媒進(jìn)行有效的檢驗，也沒(méi)有對桶的清洗規程進(jìn)行驗證。

被殺蟲(chóng)劑污染的部份化學(xué)原料藥運到了另一地點(diǎn)的第二家工廠(chǎng)生產(chǎn)制劑，使該工廠(chǎng)的流化床干燥器中物料袋受到了殺蟲(chóng)劑的污染，料造成各批產(chǎn)品受到污染，而該工廠(chǎng)根本就沒(méi)有生產(chǎn)殺蟲(chóng)劑。

1992年，FDA對一家海外原料藥生產(chǎn)廠(chǎng)發(fā)出了進(jìn)口警告，該工廠(chǎng)使用同一設備生產(chǎn)強力甾類(lèi)物質(zhì)和非甾類(lèi)物質(zhì)。該工廠(chǎng)是多品種原料藥生產(chǎn)廠(chǎng)。FDA認為交叉污染的可能性很大，對公眾的健康造成了嚴重威脅。該工廠(chǎng)僅在FDA檢查時(shí)開(kāi)始清洗驗證工作，FDA在檢查時(shí)認為該清洗驗證不當。理由之一是：工廠(chǎng)僅尋找沒(méi)有前一種物質(zhì)存在的證據。但是用TLC法檢驗洗滌水之后，找到了設備中還殘留了前一產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中的副反應物質(zhì)和降解物質(zhì)的證據。

 

 

FDA要求：建立書(shū)面標準操作程序（SOP），其中必須詳細規定設備各部件的清洗過(guò)程。若同一產(chǎn)品、不同批號的清洗使用一種方法，而更換品種時(shí)使用另一種清洗方法，應在書(shū)面規程中說(shuō)明清洗方法的不同之處。同樣，若水溶性殘留物質(zhì)與非水溶性殘留物質(zhì)的清洗方法不同，則書(shū)面規程中也應對兩種方法進(jìn)行說(shuō)明，必須明確規定在什么情況下執行哪一種清洗方法。

化學(xué)原料藥生產(chǎn)中產(chǎn)生柏油狀或粘膠狀殘留物質(zhì)的某些生產(chǎn)工序，可考慮使用專(zhuān)用設備。流化床干燥器物料袋也是一種難以清洗的設備，通常也只用于一種產(chǎn)品的生產(chǎn)。

清洗過(guò)程本身產(chǎn)生的所有殘留物質(zhì)（洗滌劑、溶媒、等）也必須從設備中除去。

 

       FDA要求：必須建立書(shū)面的清洗方法驗證通則。

      

       FDA要求：清洗方法驗證通則應規定執行驗證的負責人、批準驗證工作的負責人、驗證標準（合格標準）、再驗證的時(shí)間。

 

       FDA要求：對各生產(chǎn)系統或各設備部件進(jìn)行清洗驗證之前，應制定專(zhuān)一特定的書(shū)面驗證計劃，其中應規定取樣規程、分析方法（包括分析方法的靈敏度）。

 

   FDA要求：按上述驗證計劃進(jìn)行驗證工作，記錄驗證結果。

 

       FDA要求：做出最終的驗證報告，報告應由有關(guān)管理人員批準，并說(shuō)明該清洗方法是否有效。報告中的數據應支持結論，即：“殘留物質(zhì)已經(jīng)減少到了’可接受的限度’”。

 

 

首先，應重點(diǎn)關(guān)注驗證過(guò)程的目的。我們曾遇到過(guò)有些公司就沒(méi)有建立驗證的目的。很多工廠(chǎng)在驗證時(shí)取了大量的樣品，做了大量的檢驗，卻沒(méi)有對清洗各步操作的效果做出真正的評價(jià)。

評價(jià)清洗方法時(shí)，應注意幾個(gè)問(wèn)題：如，設備部件或設備系統到什么程度才算清潔？是否必須要用手擦洗？用手擦洗而不用溶媒清洗會(huì )得到什么效果？人工清洗時(shí)，批與批之間、不同之間有多大差異？評價(jià)和檢查清洗方法時(shí)，這些問(wèn)題都十分重要，因為檢查官必須確定該清洗方法的效果（有效性）。而且這些問(wèn)題也有助于省去多余的步驟而有效地工作，從而為公司節約資源。

檢查每個(gè)設備部件有幾種清洗方法。理想地說(shuō)，一個(gè)設備部件或一個(gè)系統只有一種清洗方法，但這還取決于生產(chǎn)的品種，以及同一品種不同批號之間、或不同品種之間是否需要清洗。若該清洗方法只用于同一品種不同批號（或同一種中間體的不同批號），則只需要達到“目視清潔”的標準即可，這種批與批之間的清洗不需要驗證。

 

 

檢查設備的型式，尤其是使用半自動(dòng)或全自動(dòng)現場(chǎng)清洗（CIP，Clean-in-place）系統的大型生產(chǎn)系統，需要重點(diǎn)檢查。如，應該使用沒(méi)有球閥的衛生型管道系統。若使用了非衛生型的球閥（這在原料藥生產(chǎn)中很普遍），清洗就會(huì )十分困難。

若在現場(chǎng)檢查中發(fā)現使用了上述類(lèi)型的設備系統，清洗操作人員必須對這種問(wèn)題有所認識，必須經(jīng)過(guò)特殊培訓，從而能夠正確清洗系統和閥門(mén)。要檢查操作工人對設備系統的了解程度、培訓水平和現場(chǎng)清洗操作的經(jīng)驗。還要檢查書(shū)面的、驗證后的清洗方法，從而確定設備系統的清洗得到了正確的驗證。

對于大型系統，如，使用長(cháng)輸送管道的設備，要檢查流程圖和管線(xiàn)圖，從而確定需要清洗的閥門(mén)以及是否有書(shū)面的清洗規程。需要清洗的管道和閥門(mén)應做出標記，易于操作人員識別。閥門(mén)標識不當（無(wú)論是圖紙還是實(shí)物）均會(huì )導致清洗不正確。

必須檢查清洗記錄是否記錄了關(guān)鍵因素。檢查生產(chǎn)工序結束至清洗開(kāi)始的時(shí)間長(cháng)短，這對于外用劑、懸浮劑和原料藥的生產(chǎn)尤為重要。因為殘留物質(zhì)干燥后，會(huì )直接影響清洗的效果。

無(wú)論是否使用現場(chǎng)在線(xiàn)清洗裝置，都應考慮檢查設備清洗中的微生物菌情況。這需要很多預防措施，而不是在染菌之后再除菌。應有證據證明：設備的日常清洗和貯存不會(huì )繁殖微生物菌。如，設備貯存之前應進(jìn)行干燥，清洗后的積水絕不能遺留在設備中。

清洗之后，會(huì )對設備進(jìn)行消毒（雖然設備可能是用于無(wú)菌生產(chǎn)或非無(wú)菌生產(chǎn)，但產(chǎn)品會(huì )產(chǎn)生微生物菌）。雖然本指南不針對消毒過(guò)程，但仍應注意檢查清洗過(guò)程和貯備過(guò)程對微生物菌的控制程度，從而保證在后續的消毒過(guò)程中能夠達到無(wú)菌規定要求。從無(wú)菌生產(chǎn)中熱原控制要求方面而言，這一點(diǎn)也十分重要。因為設備消毒無(wú)法使大量熱原滅活或除去大量熱原。

 

 

       要檢查驗證后的清洗方法是否專(zhuān)一、詳細，檢查需要記錄的項目。我們曾見(jiàn)過(guò)許多SOP通則，涉及了許多批生產(chǎn)記錄，其中要求對每一步操作做出專(zhuān)門(mén)的記錄。系統的復雜程度不同，清洗方法以及操作人員培訓程度和能力也不同，各種清洗工作或規程記錄的數量也會(huì )有不同。

       需要進(jìn)行更為復雜的清洗記錄時(shí)，必須對關(guān)鍵的清洗工序做出記錄（如，某些原粉合成工序），應有專(zhuān)門(mén)的設備記錄，包括清洗人員姓名、清洗時(shí)間。相對簡(jiǎn)單的清洗工作僅記錄“全部清洗工作已經(jīng)執行”就足夠了。

       其他因素，如清洗歷史、清洗后測出的殘留物水平、檢驗結果的可變性等有時(shí)也要記錄。如，清洗之后，殘留物含量具可變性，而又認定該清洗方法是可接受的，則必須證明清洗過(guò)程和工人操作的有效性。必須對清洗方法做出正確的評價(jià)，尤其是認為工人操作有問(wèn)題時(shí)，就更要求做出更為詳細的記錄，進(jìn)行更多的培訓。

 

 

應檢查殘留物或污染物分析方法的專(zhuān)一性和靈敏度。借助于先進(jìn)的分析技術(shù)，清洗和生產(chǎn)過(guò)程中極少的殘留物或污染物也能夠被檢查出來(lái)。檢驗不出污染物或殘留物濃度，并不能說(shuō)明清洗之后不存在殘留物污染物，而只說(shuō)明樣品中沒(méi)有分析方

法靈敏度之內或檢驗限量之內的污染物。工廠(chǎng)應對分析方法進(jìn)行挑戰性實(shí)驗，即：證明取樣方法能夠從設備表面取到污染物，其收率是多少，如50%, 90%等。根據取樣結果再做出結論。取樣技術(shù)不當也會(huì )得出相反的結論（見(jiàn)下述）。

 

 

可接受方法有的兩種。最好是直接從設備表面取樣。另一種方法是取漂洗水樣。

 

 

檢查取樣的類(lèi)型，以及對檢驗數據的影響。取樣器具可能會(huì )干擾檢驗結果。如，已發(fā)現取樣拭上的粘膠會(huì )干擾樣品的分析。在驗證初期，必須保證使用適當的取樣介質(zhì)和溶媒（用于從取樣介質(zhì)中提取樣品），并且方便使用。

直接取樣法的優(yōu)點(diǎn)在于：能夠對最難清洗、能夠到達的表面清洗程度進(jìn)行評價(jià)，從而確定選定的單位面積上殘留物/污染物含量。此外，還能夠取到“干燥”后或不溶性殘留物樣品。

 

 

具有兩點(diǎn)優(yōu)勢：能夠對較大表面積進(jìn)行取樣；能夠對到達不到的系統或日常工作無(wú)法拆卸的部位取樣并做出評價(jià)。

其缺陷是：殘留物或污染物可能是不溶性或吸藏在設備中。此時(shí)，可使用“臟點(diǎn)”類(lèi)推法進(jìn)行評價(jià)，干燥的殘留物檢驗，更不能檢測漂洗水樣，而是檢查“臟點(diǎn)”，從而確定清洗是否干凈。

通過(guò)檢驗漂洗水樣來(lái)驗證清洗方法時(shí)，應檢查是否直接檢驗了漂洗水樣中的殘留物或污染物。若僅檢測漂洗水樣的水質(zhì)情況，而不測定可能存在的污染物含量，這種做法是不能接受的。

 

 

 

進(jìn)行監測：分析方法得到驗證之后，日常檢驗可使用間接檢驗法，如電導率項目測定。由于原料藥生產(chǎn)使用了反應罐和離心機，大型設備之間用管道連接，因此只能取漂洗水樣。這種情況下，日常檢驗更需采用間接檢驗法。但必須證明間接檢驗法與設備狀況的相關(guān)性。應驗證并有書(shū)面證據證明：用間接法檢驗未清洗設備時(shí)，檢驗結果能夠證明設備不能使用以及未清洗。即：該檢驗結果能夠得出不能夠接受當前設備狀況的結論。

 

 

對于清洗方法是否得到了驗證，FDA不打算建立統一的判斷標準，這也沒(méi)有意義。因為原料藥、制劑生產(chǎn)的品種范圍太多。工廠(chǎng)應根據自身對該藥品的理解確定合理的殘留限量，該限量應是實(shí)際可測的。工廠(chǎng)還應證明分析方法的靈敏度，這一點(diǎn)十分重要。工業(yè)界已提出分析檢測的限量標準，如：10ppm；生物活性檢測限量標準，如正常治療劑量的1/1000；或感官限量標準，如“無(wú)視在殘留物”，等等。

要檢查建立殘留限量標準的方式。在這方面，原料藥與制劑不同。制劑生產(chǎn)是已知殘留物的化學(xué)名稱(chēng)（如來(lái)自于活性成份、非活性成份、洗滌劑等），而原料藥可能會(huì )無(wú)法得知，會(huì )有部份反應物和其他副產(chǎn)物。僅注意重要反應物的殘留限量是不夠的，因為其他化學(xué)變量可能更難以除去。此時(shí)，除化學(xué)分析之外，可能還需要TLC法。原料藥生產(chǎn)中，尤其是強力化學(xué)藥物，如甾類(lèi)物質(zhì)，若不使用專(zhuān)用設備，就必須考慮副產(chǎn)物殘留量的問(wèn)題。檢查的目的是保證所有限量的規定有科學(xué)的依據。

 

 

 

評價(jià)和驗證清洗方法時(shí)，有些工廠(chǎng)在相同設備、相同操作參數下生產(chǎn)無(wú)效對照劑進(jìn)行驗證。然后檢驗分析該批無(wú)效對照劑，測定是否受到了上批藥品殘留物的污染。但是，我們已經(jīng)記錄了使用無(wú)效對照劑驗證的幾個(gè)問(wèn)題。

首先是無(wú)法肯定藥品殘留物是否均勻分布于生產(chǎn)系統內。若出料閥或混料機斜槽受到了污染，分布于無(wú)效對照劑中的藥品殘留物也不均勻，出料起始階段對照劑中藥品殘留量分布通常最多。此外，若污染物或殘留物粒度較大，在對照劑中分布也不可能均勻。

有些工廠(chǎng)假定殘留物均勻地損耗于設備表面，這是無(wú)效的結論。而且任何強有力的分析手段都會(huì )因污染物的稀釋而受到削弱。由于這些問(wèn)題的存在，無(wú)效對照劑驗證法應與漂洗水樣檢驗或直接取樣檢驗結合使用。

 

 

若使用洗滌劑或肥皂清洗，應考慮檢驗殘留物質(zhì)時(shí)可能會(huì )遇到的困難。常見(jiàn)問(wèn)題是洗滌劑的組成問(wèn)題。許多洗滌劑供應商不會(huì )提供詳細的配方，使用戶(hù)無(wú)法評價(jià)其殘留物。與藥品殘留物一樣，工廠(chǎng)應評價(jià)使用洗滌劑清洗的有效性、以及除去洗滌劑殘留物的有效性，這十分重要。但是，與藥品殘留物要求不同的是：清洗之后，不得有任何濃度的洗滌劑殘留物存在（或對于高靈敏度的分析方法而言，其殘留物濃度必須極低）。洗滌劑不是生產(chǎn)工序中的物質(zhì)，而僅僅是用于幫助清洗而加入的物質(zhì)。因此，洗滌劑應易于清除。否則，就應選擇另一種類(lèi)型的洗滌劑。

 

 

有些工廠(chǎng)的做法是：自清洗開(kāi)始就一直不斷地檢驗和評價(jià)多次檢驗結果，直到潔凈為止。他們對設備和系統取樣、檢驗，再取樣、再檢驗，直至得到一個(gè)“可接受”的殘留量水平。對于采用經(jīng)過(guò)驗證的清洗方法對設備或系統進(jìn)行清洗時(shí)，不應采取這種重復取樣的做法。這種做法只有在極少數情況下可以接受。不斷地檢驗和取樣只能說(shuō)明一個(gè)問(wèn)題：即，所采用的清洗方法沒(méi)有得到驗證。因為不斷復試實(shí)際上反映并記錄了這樣一個(gè)事實(shí)：即，進(jìn)行無(wú)效清洗之后，仍有超量的殘留物/污染物存在。

 

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